GFP评价Non-stop变异对蛋白的影响

• 作 者: 袁贵丽 聂恩琼 陆家海 郭小芹
• 机 构: 中山大学公共卫生学院,广东广州,510080
• 出 处: 热带医学杂志
• 发表日期: 2018年9期
• 关键词: non-stop变异 GFP质粒 蛋白衰减

目的 通过构建的non-stop绿色荧光蛋白(GFP)质粒,了解non-stop变异对GFP的影响.方法 使用T4连接酶将合成的含有点突变的DNA短片段插入质粒pEGFP-C1生成non-stop GFP.通过荧光显微镜及Western blot观察non-stop GFP的变化.结果 non-stop GFP蛋白量少于正常GFP蛋白量,只有正常GFP条带蛋白量的12.6％.同时,non-stop GFP蛋白分子量约大于正常GFP 8 000 Mr.结论 non-stop变异使GFP持续翻译至poly(A),同时加速了蛋白的衰减.