【摘 要】
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脱水素是一类在逆境胁迫过程中诱导表达的重要功能蛋白.为了探讨脱水素基因的生物学功能,本研究以洛旱2号为研究材料,利用RT-PCR技术克隆了小麦脱水素基因TaDHN-2,qRT-PCR分
【机 构】
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河南农业大学生命科学学院,河南郑州,450002河南农业大学农学院,河南郑州,450002;
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脱水素是一类在逆境胁迫过程中诱导表达的重要功能蛋白.为了探讨脱水素基因的生物学功能,本研究以洛旱2号为研究材料,利用RT-PCR技术克隆了小麦脱水素基因TaDHN-2,qRT-PCR分析了其在ABA诱导、PEG、NaCl胁迫处理下的表达模式,检测了TaDHN-2体外活性.结果表明,TaDHN-2可编码152个氨基酸,N端包含Y片段(VDEYGNP)及S片段(SSSSSEDDGMGGRRKK),C端包含两个保守的K片段(KIKEKLPG),属于脱水素的YnSKn亚类;表达特性分析显示,TaDHN-2受植物激素ABA诱导,属于ABA依赖的基因表达调控通路.渗透胁迫过程中,该基因在中国眷和洛旱2号两个品种中具有不同的诱导表达模式,在中国春根系中的诱导表达幅度显著高于洛旱2号,而在洛旱2号叶片中的诱导表达量更高;体外活性鉴定发现,60℃高温条件下,浓度为100 μg·mL-1的TaDHN-2可使a-淀粉酶活性提高2倍;在4℃低温条件下,TaDHN-2在浓度大于20 μg·mL-1时可以提高α-淀粉酶的活性,当浓度增加到100 μg·mL-1时,可将α-淀粉酶活性提高为对照的1.6倍.以上结果说明,TaDHN-2蛋白具有显著的酶活性保护功能.
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