论文部分内容阅读
以含有敏捷食酸菌的腈水解酶基因的克隆质粒为模板,通过PCR扩增获得长度为1080 bp的腈水解酶(Nitrilase)基因片段。使用表达质粒pET-28-a构建表达载体,获得重组质粒pET-Nit。对所表达的基因进行测序对比发现与GenBank所公布的基因序列比较,相似性99%,读码框出现2 bp的突变,但并未引起相应氨基酸突变,故不影响酶的表达与特性。将重组质粒转化到表达宿主Escherichia coli Rosetta(DE3)感受态中,使用诱导剂IPTG对菌株进行诱导表达,获取菌液进行SDS-PA