【摘 要】
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目的探讨外源骨桥蛋白(OPN)对小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)迁移能力的影响。方法采用OPN-/-小鼠和野生型C57小鼠,进行MSCs的原代分离培养,流式细胞术鉴定分拣MSCs细胞传代培养
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目的探讨外源骨桥蛋白(OPN)对小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)迁移能力的影响。方法采用OPN-/-小鼠和野生型C57小鼠,进行MSCs的原代分离培养,流式细胞术鉴定分拣MSCs细胞传代培养;Transwell迁移实验检测OPN是否能够诱导MSCs定向迁移;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测OPN、CD44和Integrinβ1相关蛋白的表达变化。结果传代后的细胞形态符合MSCs特征,细胞表达CD44和CD105,但不表达CD34,符合MSCs表面标记抗原的一般规律。0.5μg/mL的OPN能增加体外MSCs的细胞迁移,而野生型C57小鼠MSCs细胞迁移为最多。同时,这一趋势与OPN作用时间正相关,与OPN-/-小鼠相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。0.5μg/mL重组OPN蛋白量明显增加,但仍低于野生型C57小鼠,差异有统计学意义(P<0.01)。若以OPN-/-小鼠为基数100,0.5μg/mL重组OPN组CD44、Integrinβ1蛋白表达增多,差异有统计学意义(P<0.01);而野生型C57小鼠细胞CD44、Integrinβ1蛋白表达最多,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 OPN可以通过上调CD44、Integrinβ1的表达,促进MSCs定向迁移。
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