东方山羊豆GoMIPS双元表达载体的构建及鉴定

来源 :家畜生态学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：asiware

【摘要】

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从东方山羊豆（Galega．orientalisL．）中克隆出的GoMIPS（肌醇-1-磷酸合成酶）基因序列设计合成1对带有NcoI和SpeI酶切位点的引物，用RT—PCR方法从东方山羊豆幼嫩叶片总RNA中扩增出GoMIP

【作者】

：

李春艳刘建宁高洪文

【机构】

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山西省农业科学院畜牧兽医研究所,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

【出处】

：

家畜生态学报

【发表日期】

：

2013年1期

【关键词】

：

东方山羊豆(Galega.orientalis L.) GoMIPS pMD19-T pCAMBIA1302 Galega. orientalis L. G

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从东方山羊豆（Galega．orientalisL．）中克隆出的GoMIPS（肌醇-1-磷酸合成酶）基因序列设计合成1对带有NcoI和SpeI酶切位点的引物，用RT—PCR方法从东方山羊豆幼嫩叶片总RNA中扩增出GoMIPS基因的cDNA序列，经纯化后，克隆至pMDl9-T载体上，构建pMD-MIPS的中间载体，测序鉴定。然后用NcoI和SpeI限制性酶对含有目的基因的pMD-MIPS和pCAMBIAl302空载体进行双酶切，通过酶切鉴定和测序分析表明，已成功构建了CaMV35S启动子驱动GFP报告基因的

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