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根据生物信息学预测的基因序列设计引物,应用RT-PCR方法从柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子总RNA扩增获得了鸡柔嫩艾美耳球虫表面抗原2(surface antigen2,SAG2)基因序列,将其与pGEM—Teasy载体连接后转化E.coli DH5α,筛选阳性克隆,以带有限制酶切位点的特异性引物用PCR方法扩增不含SAG2N端信号肽序列的ORF序列后克隆至表达载体pET-32a(+),构建了重组表达质粒pET-32a(+)-SAG2,并将其转化至E.coli BL21(DE3)。经IPTG诱导,获得了SAG