【摘 要】
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目的 探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)和Toll样受体9(TLR9)在氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠视网膜中的表达及其在OIR发病中的作用.方法 将30只7日龄C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为OIR组和对照组,每组15只.对照组小鼠于正常空气中饲养;OIR组小鼠置于含体积分数(75±2)％氧气的高浓度氧箱中饲养5 d,然后再放回正常空气中饲养5 d制备OIR模型.2组小鼠均于出生第17天处死,取眼球,采用视网膜铺片法观察视网膜新生血管形成情况,验证造模是否成功.采用免疫荧光染色和Western b
【机 构】
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新乡医学院第三临床学院,河南 新乡 453003;新乡医学院第三附属医院眼科,河南 新乡 453003
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目的 探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)和Toll样受体9(TLR9)在氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠视网膜中的表达及其在OIR发病中的作用.方法 将30只7日龄C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为OIR组和对照组,每组15只.对照组小鼠于正常空气中饲养;OIR组小鼠置于含体积分数(75±2)％氧气的高浓度氧箱中饲养5 d,然后再放回正常空气中饲养5 d制备OIR模型.2组小鼠均于出生第17天处死,取眼球,采用视网膜铺片法观察视网膜新生血管形成情况,验证造模是否成功.采用免疫荧光染色和Western blot法检测小鼠视网膜中HMGB1和TLR9蛋白的表达.结果 对照组小鼠视网膜完全血管化,自视盘中心向四周放射状均匀分布,血管形态及走形正常.OIR组小鼠视网膜中央处可见血管闭塞区,闭塞区周边可见大量新生血管簇,视网膜血管走形迂曲.免疫荧光染色显示,对照组小鼠视网膜各层间结构整齐,HMGB1蛋白呈红色,主要表达于神经节细胞层,在内核层及外核层可见少量表达;OIR组小鼠视网膜增厚,各层间结构紊乱,组织紧密度降低,HMGB1蛋白在神经节细胞层、内核层、外核层表达.对照组小鼠视网膜中TLR9蛋白(红色)主要表达于神经节细胞层、内核层;OIR组小鼠视网膜中TLR9蛋白在神经节细胞层及内核层的阳性表达增加.免疫荧光染色结果显示,OIR组小鼠视网膜中HMGB1、TLR9蛋白表达显著高于对照组(P<0.05).Western blot结果显示,HMGB1蛋白印迹条带表达于相对分子质量约25000区域,OIR组小鼠视网膜中HMGB1蛋白相对表达量显著高于对照组(P<0.05);TLR9蛋白印迹条带表达于相对分子质量约125000区域,OIR组小鼠视网膜中TLR9蛋白相对表达量显著高于对照组(P<0.05).结论 HMGB1和TLR9蛋白在OIR小鼠视网膜中表达显著增加,二者可能相互作用共同参与视网膜新生血管形成,促进OIR的发生和发展.
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