【摘 要】
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目的从精液中分离和鉴定各类生精细胞,探讨用c-kit从精液中分离生精细胞的可能性.方法对精液中圆细胞超过3×106的标本进行联苯胺兰染色,排除白细胞,再用改良非连续percoll梯
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目的从精液中分离和鉴定各类生精细胞,探讨用c-kit从精液中分离生精细胞的可能性.方法对精液中圆细胞超过3×106的标本进行联苯胺兰染色,排除白细胞,再用改良非连续percoll梯度离心,对生精细胞进行分离纯化.结合细胞形态学、荧光原位杂交,鉴别各类生精细胞的组成,运用抗人CD117单克隆抗体对纯化的细胞进行免疫细胞化学检测.结果经Percoll分离,对分离的细胞用X/Y混合探针进行荧光原位杂交,可对除精原细胞和初级精母细胞外的各级生精细胞进行准确的分类,结合形态学分析,可确定分离细胞中生精相关细胞的组成比例.在分离纯化的圆细胞中,无核胞浆小体占整个细胞比例为28.5%,细胞免疫化学研究表明,有c--kit表达的细胞占整个总细胞的比例为66.3%,且精子也表达c-kit.结论 c-kit在人类精液中各级生精细胞及精子上均表达,为从人类精液中分离各类生精细胞用于临床及科研提供了可能.
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