东亚三角涡虫DjStag基因干扰载体的构建及干扰效果鉴定

来源 :云南农业大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiamen88
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构建DjStag基因的RNA干扰表达载体,诱导表达产生dsRNA后喂食涡虫,观察DjStag表达变化及对涡虫再生的影响。本文以含有东亚三角涡虫DjStag基因的peDNA3-DjStag重组质粒为模板,经PCR扩增目的片段,将其克隆到干扰载体L4440上,构建重组质粒IA440-DjStag后转化人大肠杆菌HT115感受态细胞中,IPTG诱导表达dsRNA后喂食涡虫。显微观察涡虫再生过程中的表型变化,Real—timePCR检测干扰后涡虫DjStag基因表达的变化。结果表明,成功构建了DjStag基因的R
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