【摘 要】
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目的体外分离培养骨髓间充质干细胞,并探索表皮细胞生长因子诱导MSCs分化的潜能及条件。方法采用直接贴壁法,分离培养大鼠股骨和胫骨骨髓间充质干细胞,应用免疫细胞化学法检
【机 构】
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第三军医大学西南医院全军烧伤研究所、创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室
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目的体外分离培养骨髓间充质干细胞,并探索表皮细胞生长因子诱导MSCs分化的潜能及条件。方法采用直接贴壁法,分离培养大鼠股骨和胫骨骨髓间充质干细胞,应用免疫细胞化学法检测细胞CD44、CD106、CD29、CD90、CD34等,对分离的细胞进行鉴定。以10~40 ng/m l的表皮生长因子处理第3代MSCs,观察细胞角蛋白的表达。用W est-ern b lot方法摸索integrinβ1的表达与MSCs分化状态的关系。结果原代培养的骨髓间充质细胞CD44、CD106、CD29、CD90免疫细胞化学染色为阳性,CD34为阴性,符合骨髓间充质干细胞特征。MSCs经不同浓度的EGF体外诱导7 d后,免疫细胞化学结果显示,EGF浓度为30 ng/m l和40 ng/m l时,细胞角蛋白出现阳性表达;体外诱导14 d,呈角蛋白染色阳性的细胞比例进一步增加,同时integrinβ1表达量下降。结论体外培养的MSCs在EGF诱导下,具有分化为表皮细胞的倾向,同时integrinβ1可能在MSCs分化中具有一定的作用。
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