【摘 要】
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VDAC (Voltage-dependent anion channel)是位于线粒体外膜上参与细胞质和线粒体膜间物质及能量交换的主要通道,在细胞程序性死亡、能量代谢、物质运输以及信号转导过程中起
【机 构】
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中南民族大学生命科学学院,武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室,生物技术国家民委重点实验室,武汉,430074
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VDAC (Voltage-dependent anion channel)是位于线粒体外膜上参与细胞质和线粒体膜间物质及能量交换的主要通道,在细胞程序性死亡、能量代谢、物质运输以及信号转导过程中起着重要的作用.前期实验室在水稻基因组中鉴定出8个OsVDAC基因.为研究OsVDA C6的功能,本研究根据水稻OsVDAC6的ORF序列设计引物,将相应编码区克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,通过IPTG诱导OsVDAC6融合蛋白表达,利用Western Blot检测目的蛋白.构建了pM999-Os VDA C6-GFP瞬时表达载体,转化水稻原生质体后用激光共聚焦显微镜观察荧光信号.结果 表明OsVDAC6被成功克隆到pET-32a(+)和pM999-GFP载体,0.5 mmoL/LIPTG 16℃诱导8h可大量表达49 kD可溶性目的蛋白,并且OsVDAC6定位于线粒体.本试验结果为进一步研究OsVDAC6的功能提供了科学依据.
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