人乳头瘤病毒16L1-E5表达质粒的构建及其蛋白表达

• 作 者: 左凤琼 李婉宜 李明远 黄建 李晓红 吕梅励 赵素兰 蒋中华
• 机 构: 四川大学华西基础医学与法医学院,成都电子科技大学生命科学院,四川大学华西药学院,四川省肿瘤医院妇科
• 出 处: 西部医学
• 发表日期: 2009年6期
• 关键词: 人乳头瘤病毒16 原核表达质粒 融合蛋白 Human papillomavirus （HPV） 16 Fusion proteins Prokaryotic e

目的构建人乳头瘤病毒16L1-E5的原核表达质粒，并进行表达融合蛋白，为下一步探讨该蛋白是否能作为疫苗的研究作准备。方法以本室已构建好的阳性质粒pET32（＋）／HPV16E5为模板，PCR获得E5基因，经SalI和NotI双酶切插入已构建好的pGEX4T-1／HPV16L1，通过筛选获得正确的阳性克隆pGEX4T-1／HPV16L1-E5。pGEX4T-1／HPV16L1-E5转化入BL21感受态细胞，经IPTG诱导进行目的蛋白的表达，通过测定不同时间、不同IPTG浓度和不同温度时目的蛋白表达情况，获得