【摘 要】
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根据已发表的弓形虫主要表面抗原（ Ｐ３０）的基因序列，设计合成了一对引物，通过聚合酶链反应，扩增出 Ｐ３０ 基因，将 Ｐ３０ 基因克隆入表达质粒ｐ Ｇ Ｅ Ｍ Ｅ Ｘ１ 中，经酶切鉴定后，阳性重组质粒转化宿主菌 Ｊ Ｍ １０９（ Ｄ Ｅ３
【机 构】
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根据已发表的弓形虫主要表面抗原（ Ｐ３０）的基因序列，设计合成了一对引物，通过聚合酶链反应，扩增出 Ｐ３０ 基因，将 Ｐ３０ 基因克隆入表达质粒ｐ Ｇ Ｅ Ｍ Ｅ Ｘ１ 中，经酶切鉴定后，阳性重组质粒转化宿主菌 Ｊ Ｍ １０９（ Ｄ Ｅ３ ），宿主菌经 Ｉ Ｐ Ｔ Ｇ 诱导表达后，产物进行 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ和 Ｗ ｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析。结果显示， Ｐ３０ 基因以融合蛋白的形式表达，表达产物具有特异的免疫反应性。
According to the published sequence of Toxoplasma gondii major surface antigen (P30), a pair of primers was designed and synthesized. The P30 gene was amplified by polymerase chain reaction. The P30 gene was cloned into pGEM-X After digestion, the positive recombinant plasmid was transformed into host strain JM109 (D E3), and the host strain was induced to express by IPTG. The products were analyzed for SDS-PAGE and Western-blotting. The results showed that the P30 gene was expressed as a fusion protein and the expressed product had specific immunoreactivity.
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