【摘 要】
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目的:探讨琥珀酸脱氢酶B亚基(SDHB)对卵巢癌线粒体DNA(mtDNA)相对拷贝数的影响.方法:Real-time PCR法检测人卵巢良性肿瘤组织、卵巢癌组织中SDHB mRNA水平,检测mtDNA相对拷贝数(mtND2/HBB)和线粒体转录因子A(TFAM)水平.siRNA干扰SKOV3和A2780中SDHB表达,real-time PCR检测干扰前后mtND2/HBB、TFAM和DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs,也称作PRKDC)水平;CCK-8法检测癌细胞对顺铂的化疗耐药性.Weste
【机 构】
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上海交通大学医学院附属仁济医院妇产科,上海 200127;上海交通大学医学院附属仁济医院妇产科,上海 200127;上海市妇科肿瘤重点实验室, 上海 200127;癌基因及相关基因国家重点实验室,上海
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目的:探讨琥珀酸脱氢酶B亚基(SDHB)对卵巢癌线粒体DNA(mtDNA)相对拷贝数的影响.方法:Real-time PCR法检测人卵巢良性肿瘤组织、卵巢癌组织中SDHB mRNA水平,检测mtDNA相对拷贝数(mtND2/HBB)和线粒体转录因子A(TFAM)水平.siRNA干扰SKOV3和A2780中SDHB表达,real-time PCR检测干扰前后mtND2/HBB、TFAM和DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs,也称作PRKDC)水平;CCK-8法检测癌细胞对顺铂的化疗耐药性.Western blot法检测p-p38和DNA损伤标记蛋白γ-H2 AX蛋白水平.结果:人卵巢癌组织中SDHB表达低于卵巢良性肿瘤组织,mtND2/HBB和TFAM水平高于卵巢良性肿瘤组织.siRNA干扰SKOV3和A2780中SDHB表达后,mt-ND2/HBB和PRKDC显著升高,TFAM水平升高不显著.SDHB低表达显著上调p-p38蛋白水平,显著降低γ-H2AX蛋白水平.结论:SDHB在人卵巢癌组织中低表达,SDHB低表达显著增加卵巢癌细胞mtDNA相对拷贝数,提高卵巢癌细胞化疗耐药性,其机制可能与SDHB通过p38 MAPK通路影响DNA损伤修复相关.
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