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目的构建人巨细胞病毒(HCMV)pp65基因表达载体并初步评价其作为核酸疫苗的体内免疫效果. 方法利用分子克隆方法构建HCMV pp65表达载体pcDNA3.pp65;对其活性进行体外鉴定后,以肌肉和皮下2种途径、3种剂量组免疫小鼠;测量免疫小鼠的体重、体温等一般状况,利用MTT方法测定免疫小鼠的T细胞增殖活性、NK活性,利用ELISA方法测定小鼠的抗HCMV IgM、IgG抗体,免疫小鼠血清的病毒中和实验. 结果成功构建HCMV pp65表达载体pcDNA3.pp65并免疫小鼠后,小鼠体重、体温等一般状况未见明显变化,T细胞增殖活性增强,NK细胞活性增强,HCMV IgM、IgG抗体增高,且有时间、剂量依赖性,免疫小鼠血清对HCMV有部分中和作用. 结论 pcDNA3.pp65表达载体可引起机体特异性细胞免疫和体液免疫,可作为一种有一定应用前景的核酸疫苗进一步深入研究.