重组人尿激酶原的体外变复性研究

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目的 重组人尿激酶原在大肠杆菌中过量表达时形成不溶物包涵体,需经体外变复性后才能获得生物活性。本文旨在提高包涵体中变性尿激酶原的复性效率。 方法 通过对pH、温度、变性剂种类及浓度、蛋白浓度、以及巯基氧化还原对比率等的定性定量分析,研究重组人尿激酶原体外变复性的基本条件,并比较了添加一些非特异有效成分、脉冲稀释、梯度透析等方法对提高重组人尿激酶原体外变复性效率的作用。 结果 确定了重组人尿激酶原体外变复性的基本方法,其复性效率可达30%左右。 结论 不同的包涵体蛋白的体外变复性效率因蛋白的分子大小、二巯键数目、疏水程度等而异,对特定蛋白复性条件的优化可提高其复性效率。
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