水稻叶绿体16S启动子克隆改造、载体构建及转化研究

• 作 者: 苏宁 孙萌 李轶女 倪丕冲 沈桂芳
• 机 构: 中国农业科学院生物技术研究所,浙江大学生命科学学院
• 出 处: 植物学通报
• 发表日期: 2003年3期
• 关键词: 水稻 16S启动子 叶绿体转化
• 基金项目: 国家自然基金(No.3 9970 472 );农业部 948项目(No .9910 2 0)

利用PCR方法从水稻叶绿体基因组DNA中分离16S启动子, 并在其下游加入rbcL基因SD序列,以增强该启动子的翻译能力;序列分析表明, 除加入的SD序列外, 扩增片段与水稻(Oryza sativa)叶绿体基因组DNA序列16S启动子相应区域同源性为100%.将16S启动子与bar基因和gfp基因的融合基因连接, 以psbA基因的3′序列为终止子, 并以烟草叶绿体trnH-psbA和trnK为同源片段构建了烟草叶绿体表达载体pR16S. 用基因枪转化烟草, 转化植株经Southern、Northern检