【摘 要】
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目的 观察放射干预对人端粒酶逆转录酶基因(hTERT)启动子启动活性以及鼻咽癌靶向调控的影响.方法 利用基因重组技术构建pCL-3-hTERTp质粒以及pcDNA3.1.hTERT.CD/UPRT质粒,脂
【机 构】
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中南大学湘雅医院,耳鼻咽喉科,湖南,长沙,410008
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目的 观察放射干预对人端粒酶逆转录酶基因(hTERT)启动子启动活性以及鼻咽癌靶向调控的影响.方法 利用基因重组技术构建pCL-3-hTERTp质粒以及pcDNA3.1.hTERT.CD/UPRT质粒,脂质体介导重组质粒pGL-3-hTERTp转染鼻咽癌CNE-2细胞以及人成纤维皮肤细胞(HDF),并给予不同剂量放射干预,双荧光素酶活性分析其启动活性变化.pcDNA3.1.hTERT.CD/uPRT质粒转染鼻咽癌CNE-2细胞;运用RT-PCR以及免疫印迹法检测不同放射剂量下自杀基因表达.结果 接受放射干预后,hTERT启动子活性明显增强,给予2、6、10 Gy放射干预后,其启动活性分别增加了10倍、19倍和34倍,其差异有统计学意义(P0.05).pcDNA3.1.hTERT.CD/UPRT质粒转染CNE-2细胞后,放射剂量增加至6、10 Gy检测到目的 基因表达.结论 放射干预可提高hTERT启动子在鼻咽癌CNE-2细胞中的启动活性,且对其肿瘤特异性无影响.以放疗为主的肿瘤治疗中,hTERT启动子可能为潜在靶向性基因治疗的备选因子.
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