SELEX技术筛选入rhTGF—βsRⅡ亲和核酸库方法的建立

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目的建立SELEX技术筛选rhTGF-βsRⅡ单链DNA亲和核酸库的方法,为后续分离rhTGF-βsRⅡ的单一核酸适体奠定基础。方法体外构建了一个长度为108nt、含60个随机核苷酸序列的ssDNA随机库。将靶蛋白rhTGF-βsRⅡ预先吸附到固相栽体Phenyl-Agarose上,再与ssDNA随机库温育,洗脱未结合核酸片段,回收与rhTGF-βsRⅡ结合的ssDNA。行PCR扩增时,采用5’端生物素化的下游引物,使PCR产物偶联上生物素。变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化PCR产物。利用Immobilized
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