组织蛋白酶B酶联免疫吸附测定方法的建立

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组织蛋白酶B(CB)与恶性肿瘤的分期、转移和预后关系密切。目的:建立CB酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,以便评价肿瘤患者血清CB含量与预后的关系。方法:将含有CB cDNA的重组痘苗病毒转染Hela细胞,表达目的蛋白重组CB;经Western blot分析和制备型电泳纯化后,免疫新西兰大白兔,获得CB多克隆抗。纯体后的抗体一部分作为固化抗体,另一部分用辣根过氧化物酶标记;棋盘滴定法确定工作浓度。结果:痘苗病毒真核表达系统可以高效表达目的蛋白。制备型电泳能简单、有效地纯化蛋白。重组CB免疫动物后,可获
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