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目的
构建一种缓释FGF2基因的"壳核"结构的壳聚糖缓释微球。"核"是包埋FGF2基因质粒的巯基烷基化壳聚糖(TACS)、"壳"是羟丁基壳聚糖(HBC)，探讨该壳聚糖壳核微球对颗粒脂肪移植存活率的影响。
方法制备HBC@TACS-pFGF2-EGFP壳核缓释微球，检测核壳结构包载基因缓释基因的释放规律。Western-blot检测该缓释微球体外转染293T细胞后表达FGF2蛋白的情况。细胞增殖实验证明10 μg/ml的pFGF2质粒可促进293T细胞生长。取18只新西兰白兔用于颗粒脂肪移植实验。兔左耳作为实验组，移植2 ml脂肪颗粒和HBC@TACS-pFGF2-EGFP；兔右耳作为对照组，移植2 ml脂肪颗粒和HBC@TACS-空载质粒。分别于颗粒脂肪移植术后第4、8、12周切取标本，行大体观察、HE染色、免疫组化染色，观察移植物的生物学特性、脂肪移植成活率及新生血管密度。
结果HBC@TACS-pFGF2-EGFP在体外可缓慢释放pFGF2-EGFP基因，而且在转染293T细胞后可成功表达FGF2蛋白。颗粒脂肪移植术后不同时间点取材，发现移植后的脂肪组织体积随时间推移逐渐减小，整个实验过程中实验组的脂肪体积、脂肪移植成活率均大于对照组(P<0.05)，HE染色显示实验组的新生脂肪组织细胞排列较对照组更为规则，免疫组化染色显示实验组脂肪组织的微血管密度和FGF2蛋白表达水平均高于对照组(P<0.05)。
结论缓释FGF2基因的HBC@TACS-pFGF2-EGFP微球可提高颗粒脂肪移植存活率。