人caspase-1真核表达载体的构建及表达

• 作 者: 李青春 张素华 马晓君 肖伟玲 梁淑娟
• 机 构: 山东省高校免疫学重点实验室
• 出 处: 潍坊医学院学报
• 发表日期: 2009年3期
• 关键词: 肝肿瘤 真核表达载体 CASPASE-1 Hepatoma Expression vector Caspase-1

目的构建人caspase-1真核表达载体，观察其在人肝癌细胞HepG2中的表达。方法分离人外周血淋巴细胞，LPS刺激提取细胞总RNA,RT-PCR方法分别扩增caspase-1两片段S1、S2，利用重叠延伸PCR方法（SOE）获得caspase-1全长序列，将其克隆入pIRES2-EGFP载体，进行菌落PCR、限制性酶谱分析、DNA序列测定。通过jetPEI方法转染HepG2肝癌细胞，倒置相差荧光显微镜下观察其表达情况，RT-PCR分析caspase-1的表达水平。结果份外周淋巴细胞中经RT-PCR分别扩