肝癌胰岛素样生长因子Ⅱ基因启动子P3甲基化的检测及意义

• 作 者: 黄卫 杨冬华 汤绍辉
• 机 构: 暨南大学附属第一医院消化内科
• 出 处: 暨南大学学报：自然科学与医学版
• 发表日期: 2004年6期
• 关键词: 肝细胞癌 胰岛素样生长因子Ⅱ 启动子 甲基化 hepatocellular carcinoma insulin-like growth factor II
• 基金项目: 国家自然科学基金(30070853),,暨南大学自然科学基金(2003)

目的：建立检测肝癌胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因启动子P3甲基化状态的方法。方法：培养三株肝癌细胞系(BEL7402、SMMC7721、HepG2)，选取正常肝组织3例；提取基因组DNA，亚硫酸氢钠修饰，巢式聚合酶链反应(nested PCR)加甲基化特异性PCR(MSP)检测IGF-Ⅱ基因启动子P3的甲基化状态，PCR产物经克隆、测序验证。结果：三株肝癌细胞系IGF-Ⅱ基因启动子P3去甲基化，正常肝组织IGF-Ⅱ基因启动子P3甲基化，目的片段无突变，甲基化修饰完全。结论：巢式PCR加甲基化特异性P