人胰岛素原类似物(BKRA)基因三联体的构建与表达

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将人胰岛素原类似物(BKRA)基因通过人工接头串联,形成基因三联体,接头部分的氨基酸序列为RRNSM。该串联基因与表达载体pET-28a(+)重组后,实现了在大肠杆菌中的高效融合表达,表达产物以包涵体形式存在,约占细菌总蛋白的31%。以HiTrap凝胶进行亲和层析初步纯化,纯度可达93%。放射免疫测定表明,纯化的融合蛋白具有胰岛素抗原活性,为进一步生产基因工程胰岛素打下了基础。
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