【摘 要】
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为确保ＲＡＰＤ结果的重复性和真实性，本文对影响大豆ＲＡＰＤ结果的主要因素进行了研究。这些因素包括：Ｔａｑ酶、ＭｇＣｌ２、模板、ｄＮＴＰｓ、引物浓度，双引物扩增及热循环数。最终优化的大豆ＲＡＰＤ反应体系为：２５ｕｌ反应液中，１０倍反应
【机 构】
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东北农业大学大豆研究所,中国科学院遗传研究所,齐齐哈尔市种子局
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为确保ＲＡＰＤ结果的重复性和真实性，本文对影响大豆ＲＡＰＤ结果的主要因素进行了研究。这些因素包括：Ｔａｑ酶、ＭｇＣｌ２、模板、ｄＮＴＰｓ、引物浓度，双引物扩增及热循环数。最终优化的大豆ＲＡＰＤ反应体系为：２５ｕｌ反应液中，１０倍反应缓冲液（１００ｍＭＴｒｉｓ－ＨＣｌｐＨ８．０，５００ｍＭＫＣｌ，０．１％ｇｅｌａｔｉｎ），２．０ｍＭＭｇＣｌ２，ｄＣＴＰ、ｄＧＴＰ、ｄＴＴＰ、ｄＡＴＰ各为０．２ｍＭ，１５ｎｇ引物，２５ｎｇＤＮＡ，１ｕＴａｑ酶。研究结果还表明，双引物比单引物扩增的小片段数增多，但也存在着原有单引物扩增条带缺失现象。
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