抗前列腺特异抗原/抗人CD3双特异性单链抗体基因在HeLa细胞中的表达及亲和活性测定

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:loveqwg
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目的 在HeLa细胞中表达抗前列腺特异抗原(PSA)/抗人CD3双特异性单链抗体(scFv)融合基因,并进行亲和活性测定.方法在已经构建抗PSA/CD3双特异性scFv融合基因基础上,将融合基因克隆入真核表达载体pSecTag2-B中,并转染HeLa细胞进行表达.表达产物纯化后,用流式细胞仪进行亲和活性测定.结果经SDS-PAGE和Western印迹实验证实,表达产物的Mr约为65000.纯化后经流式细胞仪检测,可特异性地结合PC-3细胞和人外周血单个核细胞(PBMC).结论获得了可与PC-3细胞和PBMC特异结合的抗PSA/CD3双特异性scFv,为进一步临床应用奠定了基础。

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