SOX9慢病毒表达载体的构建及其在LNcap细胞中的稳定表达

• 作 者: 王江 段君君 张小玉 贾霄 汪小波 何颖红
• 机 构: 大理大学基础医学院,云南省高校细胞生物学重点实验室
• 出 处: 昆明医科大学学报
• 发表日期: 2018年2期
• 关键词: SOX9 慢病毒表达载体 LNCAP细胞 脂质体转染 SOX9Lentiviral vectorLNcap cellLiposome tansfection
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目(31360288)

目的构建SOX9基因慢病毒表达载体,建立稳定表达SOX9的LNCaP细胞株.方法PCR扩增SOX9基因,将其克隆到慢病毒表达载体pLVX-IRES-Puro中,双酶切和测序鉴定重组质粒.用HEK293细胞包装重组病毒颗粒并感染LNcap细胞,经puromycin筛选获得稳定转染细胞株.qRT-PCR和Western Blot分别检测SOX9 mRNA水平及蛋白表达.结果经双酶切和测序鉴定证实目的片段已插入到慢病毒表达载体上.重组质粒转入LNCaP细胞后经puromycin抗性筛获得稳定表达的细胞株,qRT