论文部分内容阅读
目的
观察肝细胞核因子4(HNF4)在肝癌细胞SMMC7721中对干细胞特性及上皮-间充质转化的影响。
方法分别利用烟酸己可碱33342(Hoechst33342)染色及CD133流式细胞术分选肝癌细胞SMMC7721，通过Western blot检测侧群细胞及CD133＋细胞中HNF4的表达水平，转染HNF4特异性siRNA沉默HNF4的表达，通过Western blot检测细胞中上皮-间充质转化相应标志蛋白的变化；最后通过流式细胞术及体外细胞球体形成实验检测沉默HNF4对干细胞特性的影响。
结果Hoechst33342阴性的侧群细胞占细胞总数的比例为(8.77±0.59)%，而CD133＋细胞占细胞总数比例为(4.19±0.26)%，侧群细胞及CD133＋细胞中HNF4的表达水平分别较Hoechst33342阳性及CD133-细胞明显降低，而沉默HNF4可促进细胞上皮性标志蛋白的下降，伴随间质性标志蛋白升高；沉默HNF4后可升高肝癌细胞中的侧群细胞比例(NC比si-HNF4＝7.73±0.57比22.38±2.56)及CD133＋细胞比例(NC比si-HNF4＝4.67±0.56比17.31±1.77)，同时促进SMMC7721细胞成球(NC比si-HNF4＝1.67±0.62比5.33±1.52)。
结论HNF4在维持肝癌细胞干细胞特性发挥重要作用，沉默其表达可促进肝癌细胞上皮-间充质转化，并增强肝癌细胞的干细胞特性。