【摘 要】
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目的:观察甲状旁腺激素(PTH)1-34是否可以阻断晚期糖基化终末产物(AGEs)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的负性成骨作用及其可能信号通路。方法:采用全骨髓法分离培养4周龄SD
【机 构】
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山西医科大学第一医院内分泌科，太原 030001山西医科大学第二医院重症医学科，太原 030002;河北医科大学实验诊断学教研室，石家庄 050011;山西白求恩医院骨科，太原 030032;
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目的:观察甲状旁腺激素(PTH)1-34是否可以阻断晚期糖基化终末产物(AGEs)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的负性成骨作用及其可能信号通路。方法:采用全骨髓法分离培养4周龄SD大鼠的BMSCs，分别给予成骨诱导液、牛血清血蛋白(BSA)、AGEs、AGEs联合PTH1-34预处理，7 d后行实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原酶(COL-Ⅰ)mRNA表达水平，Western印迹法检测β-catenin、osterix(OSX)、核心结合蛋白因子2(RUNX2)、终末期氨基糖基化受体蛋白表达水平。21 d后采用茜素红染色检测矿化结节并定量；在10n －8 mmol/L的PTH1-34中加入Wnt通路特异性阻断剂Dickkopf-1(DKK1)1 μg/ml后，Western印迹法再次检测β-catenin、OSX、RUNX2蛋白表达水平。n 结果:AGEs抑制ALP、COL-Ⅰ mRNA及β-catenin、OSX、RUNX2蛋白表达(n P<0.05)，而PTH1-34预处理后逆转AGEs的作用，ALP、COL-Ⅰ mRNA及β-catenin、OSX、RUNX2蛋白表达较AGEs组增加(n P<0.05)，茜素红染色矿化结节呈红棕色且增多，定量检测n OD值，PTH1-34预处理组高于AGEs组(n P<0.05)。DKK1(1 μg/ml)作用后，β-catenin、OSX蛋白表达均较BSA组减少(n P<0.05)。n 结论:PTH1-34可通过Wnt/β-catenin信号通路阻断AGEs对BMSCs的负性成骨作用。
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