【摘 要】
：
为了获得可用于X射线衍射的恶臭假单胞菌尼古丁代谢途径中关键单加氧酶Hsp B的单晶。定点突变PCR构建重组质粒,大肠杆菌中诱导表达,镍柱亲和层析、烟草蚀纹病毒（Tobacco etch
【机 构】
：
上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室
【基金项目】
：
国家自然科学基金项目（31230002,31470223）
论文部分内容阅读
为了获得可用于X射线衍射的恶臭假单胞菌尼古丁代谢途径中关键单加氧酶Hsp B的单晶。定点突变PCR构建重组质粒,大肠杆菌中诱导表达,镍柱亲和层析、烟草蚀纹病毒（Tobacco etch virus,TEV）蛋白酶酶切和凝胶过滤层析纯化,悬滴扩散法进行结晶。成功构建重组质粒并获得高表达;比较了TEV蛋白酶柱上及透析酶切的效率,TEV蛋白酶透析酶切效率更高;确定了该纯化路线,获得电泳纯级的Hsp B蛋白。结晶条件初筛和正交优化后获得可培养Hsp B蛋白单晶的条件为22%PEG3350、0.1 mol/L Bi
其他文献
从认识你的那一刻起，你壮丽的山河，伟大的历史，就深深感动了我；我念念不忠对你的爱啊，因为我是你的儿子!
【正】 院校是知识分子比较集中的地方,从事专业教学工作的广大知识分子,既是我们各级党组织开展思想政治工作的主要对象,同时又是我们对学员进行思想政治工作的重要力量。尤
通过微生物培养方法对北京香山黄栌叶片内生细菌进行分离及筛选，共得到81株内生细菌，经形态学观察、16SrDNA扩增及系统发育分析，将其归为变形茵门（Proteobacteria）中的欧文氏茵属（E
【正】 提高思想政治工作透明度是时代和受教育者本身的要求改革、开放的大趋势,向人们提出了许多全新的问题,因而,思想政治工作,必然面临许多新的挑战。如对外开放,国际社会
CGA-N46是人嗜铬粒蛋白N端具有抗真菌活性的多肽片段。采用MTT法检测CGA-N46对克柔念珠菌生长的抑制作用,以β-1,3-葡聚糖酶活性检测克柔念珠菌细胞壁的完整性,采用PI检测克
【正】 我国加快改革开放的新形势,为军事科技支援国家经济建设开辟了广阔的战场。它对于促进生产力的发展,增强综合国力,密切军政军民关系,培养锻炼军队科技队伍,多出成果具
为了改善高密度发酵生产β-甘露聚糖酶过程中的溶氧限制,提高β-甘露聚糖酶产量,将VHb和β-甘露聚糖酶基因置于AOX1启动子调控之下,进行VHb和β-甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中
While fossil fuels greatly contribute to human society,they pose great challenges to natural resources,the environment,and climate change.Developed countries,li
瘤胃中的产甲烷菌为严格厌氧微生物，很难通过分离培养的方法进行研究。现已经培养并公布的瘤胃产甲烷菌只有4种，成千上万种类的瘤胃产甲烷菌不能培养出来。未培养技术的发展与
本文结合电力电子电路的特点,系统介绍了二阶变步长后向差分法(BDF)离散伴随网络及变步长的方法。该方法稳定性好,变步长容易,运算工作量小,最后给出了具体的电力电子电路计