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甲状腺素(T4)和3,5,3’-三碘甲状腺原氨酸(T3)的酶联免疫吸附试验(ELISA)涉及2个方面:半抗原与羧基载体蛋白偶联制备抗体;与氨基偶联制备检测标签。为提高抗体的效价和特异性,T4与T3氨基乙酰化后,免疫原可直接或通过己二酸二酰肼(ADH)将羧基偶联到牛血清白蛋白(BSA)上。直接偶联导致每分子BSA结合40~50mol T3和T4,这有助于提高特别是T4的免疫反应和特异性。免疫原的高抗原表位密度诱发更好的抗体反应,ADH的连接物为间隔臂,引入18~27mol半抗原与载体蛋白结合,对抗体的制备影