【摘 要】
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将我国登革2、4型病毒分离株PrM-E基因通过RT-PCR以病毒RNA为模板扩增我国登革2型43株和4型B5株的PrM-E基因.并分别克隆至pGEM-T Easy载体,然后亚克隆至双顺反子表达质粒的
【机 构】
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军事医学科学院微生物流行病研究所,北京,100071
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将我国登革2、4型病毒分离株PrM-E基因通过RT-PCR以病毒RNA为模板扩增我国登革2型43株和4型B5株的PrM-E基因.并分别克隆至pGEM-T Easy载体,然后亚克隆至双顺反子表达质粒的两个多克隆位点,获得同时含有登革2型43株和4型B5株PrM-E基因的双顺反子重组表达质粒pIDME2/4. 在用该重组质粒转染的BHK21细胞中,不但可检测到PrM-E基因的转录产物,而且采用间接免疫荧光法还可观察到针对登革2型/4型病毒的特异荧光.研究结果表明,重组的双顺反子表达质粒在真核细胞中可共表达登革两个血清型PrM-E基因,为双价登革核酸疫苗的研究奠定基础.
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