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目的
建立多重PCR反向斑点杂交方法(PCR-RDB)技术快速检测儿童急性呼吸道感染DNA病毒，以便及时监测并快速诊断急性病毒性呼吸道感染。
方法参照国家生物技术信息中心(NCBI)数据库病毒核酸序列设计多重PCR引物和探针，将特异的寡核苷酸探针固定于尼龙膜上。利用多重PCR对人博卡病毒(hBOV)、KI多瘤病毒(KI)、腺病毒(AdV)、WU多瘤病毒(WUPyV)、人细小病毒B19(HPVB19)等5种DNA病毒进行扩增，扩增产物变性后与各特异性探针进行杂交、显色并分析结果，并对其敏感性、特异性进行测试。同时通过反向斑点杂交检测108例临床标本的多重PCR产物，并与培养法结果做对比分析。
结果建立的多重PCR-RDB方法各特异探针只相应扩增产物杂交，与其他病原体无交叉反应，敏感性达1 CFU。108例临床咽拭子标本PCR-RDB方法共筛选出阳性37例(34.26%)，高于临床常规检测方法的30例(27.78%)。
结论应用多重PCR-RDB技术可简便、快速、准确地检测儿童急性呼吸道感染DNA病毒，具有很好的临床应用前景。