【摘 要】
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目的·研究沉默调节蛋白3(sirtuin3,SIRT3)去SUMO化修饰对乳腺癌细胞的增殖和耐药性的影响.方法·用CRISPR-Cas9质粒pX330-sgRNA敲除MCF7乳腺癌细胞系SIRT3基因,构建SSIRT3KO的MCF7细胞系;在此细胞系基础上,利用表达SIRT3 K288R(SUMO化修饰位点突变型)和SIRT3 WT(野生型)的反转录病毒,以及空载对照(Vector)病毒进行感染,以构建SIRT3 SUMO化修饰位点突变的细胞系及其对照细胞系.3种细胞株在相同条件下培养后进行细胞计数并在显
【机 构】
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上海交通大学基础医学院生物化学与分子细胞生物学系,上海200025;上海交通大学附属第一人民医院妇产科,上海201620;上海交通大学医学院附属精神卫生中心物质成瘾科,上海200030;上海交通大学医
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目的·研究沉默调节蛋白3(sirtuin3,SIRT3)去SUMO化修饰对乳腺癌细胞的增殖和耐药性的影响.方法·用CRISPR-Cas9质粒pX330-sgRNA敲除MCF7乳腺癌细胞系SIRT3基因,构建SSIRT3KO的MCF7细胞系;在此细胞系基础上,利用表达SIRT3 K288R(SUMO化修饰位点突变型)和SIRT3 WT(野生型)的反转录病毒,以及空载对照(Vector)病毒进行感染,以构建SIRT3 SUMO化修饰位点突变的细胞系及其对照细胞系.3种细胞株在相同条件下培养后进行细胞计数并在显微镜下进行观察,确定细胞数量和形态的变化;用不同浓度的阿霉素分别处理细胞24、48、72 h,检测3种细胞株的耐药程度.结果·成功构建了敲除SIRT3的MCF7细胞系,并利用反转录病毒感染构建了表达SIRT3 K288R和SIRT3 WT以及空载对照的细胞系;通过细胞计数发现,在相同培养时间下,SIRT3 K288R细胞系的增殖速率显著低于SIRT3 WT和Vector细胞系(P=0.000);在显微镜下测量非黏附性乳腺球群细胞的大小,发现SIRT3 K288R细胞系的直径较SIRT3 WT和Vector细胞系小,增殖缓慢.阿霉素耐药实验结果显示,在细胞培养24、48和72h时,不同阿霉素浓度(1.25、2.5、5和10μg/mL)处理下的SIRT3 K288R细胞系的活性均显著高于SIRT3 WT和Vector细胞系(均P<0.05);并且相比另外2个细胞系,阿霉素在SIRT3 K288R细胞系中的半数抑制浓度(IC50)也较高.结论,去 SUMO化修饰的SIRT3能抑制乳腺癌细胞MCF7的增殖,但增加其对阿霉素的耐药性.
其他文献
目的:探析补气温阳法在老年性胸腰椎骨折中后期便秘中的治疗效果.方法:选取老年性胸腰椎骨折中后期便秘患者230例,采用随机数字表法将其分为对照组(114例)与治疗组(116例).对照组予以口服聚乙二醇4000散治疗,治疗组则接受补气温阳法其方药(配方颗粒)治疗,两组均以连续治疗1周为1个疗程,均行2个疗程的治疗.采用Cleveland便秘评分系统(CCS)评价患者治疗前后的便秘严重程度,Bristol大便性状分型法评价大便性状,并对患者的中医证候积分进行统计.评价两组的治疗效果,患者治疗前后胃肠功能以及肠道
目的:探究白鹤血尿净方加味治疗镜下血尿疗效及对临床症状积分、血及尿胱抑素C(Cys-C)、肌酐(Cr)、β2-微球蛋白(β2-MG)的影响.方法:选取81例镜下血尿患者为研究对象,将患者随机分为对照组(n=38)和观察组(n=43).对照组患者予以阿魏酸哌嗪片治疗,观察组患者予以白鹤血尿净方免煎颗粒剂治疗.比较两组患者治疗10周后疗效差异,比较两组患者治疗前、治疗10周后临床症状积分、血清Cys-C、Cr、β2-MG、尿液Cys-C、Cr、β2-MG水平差异.结果:治疗10周后,两组患者总体疗效差异显著,
“脾藏营”理论来源于《黄帝内经》,其本质是脾主转运.脾的正常转运是脾藏营功能正常的基础,是五脏六腑畅达的重要生理环节.脾藏营失司则脾营不足、脾营不运,机体代谢异常.糖尿病胃轻瘫是一种常见的代谢性疾病,以脾失健运,气机升降失常为基本病机,病程日久引起脾不升,胃不降,以胃动力障碍,胃排空延迟为主要临床表现,即脾藏营失司是糖尿病胃轻瘫核心病理环节.线粒体应激是糖尿病胃轻瘫的重要发病机制,线粒体是物质能量代谢的核心细胞器与中医学之“脾”具有异曲同工之妙,健脾助运法能调节线粒体应激,恢复脾藏营功能,改善糖尿病胃轻瘫
目的:探究温针灸联合益气滋阴方对糖尿病周围神经病变(DPN)患者氧化应激水平及神经电生理的影响,为DPN患者的诊疗提供指导依据.方法:60例DPN患者为研究对象,按照随机数字表法,将60例患者分成观察组和对照组各30例.对照组在常规降糖基础上给予依帕司他片口服治疗,观察组在对照组的基础上,给予温针灸和益气滋阴方治疗.比较两组治疗前后的多伦多临床评分系统(TCSS)和患者下肢神经的传导速度(SCV和MCV),血清超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)等氧化应激指标,并观察两组肌电图疗效.采用随机行走模型
目的:观察脑卒中恢复期患者采用乙癸愈风汤结合针灸治疗疗效.方法:选取脑卒中患者80例,均处于恢复期,随机分为联合组和西医组各40例,西医组患者给予西医常规治疗,联合组患者在此基础上给予乙癸愈风汤结合针灸进行联合治疗,2周为1个疗程.比较两组患者临床疗效,观察并比较两组患者治疗前后NIHSS和ADL评分、免疫功能、炎性因子水平,观察两组患者生活质量评分和并发症例数.结果:联合组治疗有效率(92.50％)高于西医组(72.50％),差异有统计学意义(P0.05);治疗后两组患者NIHSS评分均降低,ADL评分
手部湿疹(H E)是一种临床上常见的炎症性皮肤病,具有反复发作、易成慢性、缠绵难愈等特点.近期研究表明中药外洗法治疗手部湿疹的疗效颇佳,在临床应用中,不仅可以单独使用,还可以联合其他中医疗法或西医治疗.因此就近年来中药外洗法治疗HE的研究进行概述,从而为临床治疗HE提供新的方法与选择.通过总结文献资料来阐述HE的基本病因病机,中药外洗法用治HE的理论基础,及近年来中药外洗法单用或联合其他疗法治疗HE的临床研究概况.研究发现单用中药外洗法治疗HE疗效确切,联合其他中西医疗法还可以进一步提高临床疗效.中药外洗
新中国成立之初,政府通过推行一系列卫生政策和措施,快速提升了人民健康水平.疫苗研发生产和公共卫生机构建设是落实“预防为主”政策的重要支撑,在控制各类传染病流行中发挥了重要作用.新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎)疫情发生以来,中国快速部署5条新型冠状病毒疫苗(简称新冠疫苗)研发技术路线.通过社会防控举措的实施和疫苗接种,疫情得到快速和持续的控制.但由于全球疫情的反复,中国“外防输入、内防反弹”的压力持续增加,如何调整疫情防控策略备受关注.该文从新冠疫苗研发、疫苗接种、免疫策略动态调整、加强免疫、新冠疫苗老年人
急性腰扭伤是骨科门诊常见病,主要表现为腰部疼痛,活动受限,严重影响患者的生活质量.本病西医主要以消炎镇痛为主,但非甾体抗炎药不良反应大,不利于患者的健康.随着科学技术及现代医学的发展,中医药治疗急性腰扭伤的机制被逐渐阐明,其临床疗效正被逐渐认可,中医药治疗急性腰扭伤不仅可以明显缓解患者疼痛等症状,促进腰椎功能恢复,而且还具有起效迅速、廉价、安全性高等特点.现通过搜索查阅国内外中医药治疗急性腰扭伤的文献报道,从中药、针灸推拿、拔罐、刺络放血、小针刀、穴位注射、正骨手法、运动疗法、综合治疗等方面阐述各自的疗效
目的:探究手足十二针联合加味茵陈蒿汤对非酒精性脂肪肝患者肠道菌群的影响.方法:选取非酒精性脂肪肝治疗的患者共115例,通过完全随机法对115例患者进行分组,将其分为对照组57例,联合组58例.对照组使用加味茵陈蒿汤治疗,联合组在对照组的基础上联合手足十二针进行治疗,对比两组病情恢复情况.检测两组中医证候评分、肝功能、血脂水平,酶联免疫吸附试验法检测白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)水平,改良TIANamp Stool DNA Kit方法进行乳杆菌、肠
复发性流产在育龄期妇女群体中发病率较高,反复的妊娠丢失会造成女性生理和心理上的双重损害,严重威胁生命健康.肠道微生态广泛参与营养代谢、免疫调节、应激反应等正常生理行为,其作为目前的新兴领域已被证明与多种妇产科疾病的发生密切相关.肠道菌群失调,可能会通过干扰母体的适应而对妊娠结局产生不利影响并导致妊娠并发症.但由于其与复发性流产的研究较少,现从全身炎症反应、免疫失衡、血栓前状态、滋养细胞受损的西医机制和肾、肝、脾为由的中医理论出发,阐述了肠道菌群失调参与肾虚血瘀型不明原因复发性流产发生的可能机制,提出复发性