二烯丙基二硫诱导人白血病HL-60细胞分化差异表达cDNA文库的构建

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应用抑制性消减杂交技术构建二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人白血病细胞分化的消减杂交cDNA文库,以期克隆DADS诱导人白血病HI。一60细胞分化的相关基因。方法用DADS诱导人白血病HI。-60细胞分化,提取polyA^+ RNA,反转录合成cDNA,消化成短片段后分成两组,分别与两种不同的接头连接,再与未处理的白血病细胞cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR扩增,将PCR产物与pGEM—T线性载体连接,转化大肠杆菌进行文库扩增,随机挑取克隆进行酶切鉴定。结果成功地构
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