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目的载体加dT尾是基于非模板扩增特性而发展起来的．是TA克隆技术的关键步骤之一．但实际应用中加尾率不高，为此对不同二价阳离子对载体加dT尾的影响效果进行比较．以摸索高效加尾条件。方法用限制性内切酶SmaI将质粒pGEM7Zf（＋）消化成平末端的线性片段．借助二价阳离子和砌DNA聚合酶的作用在线性片段3’-末端上添加dTTP，随后与Control Insert DNA连接成环状DNA，再转化进E.coli DH5α-FT。根据白色菌落所占比例来评价不同种类和浓度的二价阳离子对T-载体生成的影响。结果不同种类