【摘 要】
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采用RT—PCR方法克隆猪流感病毒H3N2亚型NS1全长基因，构建NS1基因原核表达质粒pET-28a—NS1和真核表达质粒p3XFLAG—CMV—NS1，在大肠杆菌和真核细胞内表达NS1基因，制备抗NS1多克
【机 构】
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中国农业科学院上海兽医研究所,华南农业大学兽医学院
【基金项目】
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上海市浦江人才计划资助（07PJ14109）,中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金重点项目“猪流感病毒与p53分子作用机制的研究”（2007JB02）.
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采用RT—PCR方法克隆猪流感病毒H3N2亚型NS1全长基因，构建NS1基因原核表达质粒pET-28a—NS1和真核表达质粒p3XFLAG—CMV—NS1，在大肠杆菌和真核细胞内表达NS1基因，制备抗NS1多克隆抗体。用所制备的抗体分析p3xFLAG—CMV—NS1转染表达NS1蛋白和病毒感染细胞内的NS1蛋白。经终浓度为1mmol／L的IPTG诱导后，重组蛋白NS1在大肠杆菌中得到表达。表达蛋白纯化后免疫Wistar大鼠制备抗NS1蛋白多克隆抗体，Western—blot分析表明抗NS1多克隆抗体可以识
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