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本文探寻从微生物转化液中分离纯化5-氟尿苷(5-FUR)的工艺条件。先后尝试大孔吸附树脂、大孔弱碱性阴离子交换树脂以及硅胶柱色谱的分离方法。利用大孔弱碱性阴离子交换树脂吸附，1mol/L NaCl洗脱得到含量较高的两种含氟化合物，通过硅胶柱色谱，采用正己烷-乙酸乙酯(含10％醋酸)为流动相进行洗脱，收集5-FUR粗品进行旋蒸结晶水溶解，最终得到了纯度为100％的精品。在目标化合物和杂质理化性质极其相似，含量极其悬殊的条件下，成功去除含量极高的杂质，实现了5-FUR的分离纯化，取得令人满意的结果。