【摘 要】
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为了获得翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)基因,提取恶性疟原虫海南株(FCC1)总RNA,直接用总RNA反转录成单链DNA,再用长距PCR方法扩增出双链cDNA.根据小鼠约氏疟原虫TCTP基因序列设计引
【机 构】
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军事医学科学院微生物流行病研究所药学研究室,北京,100071军需大学基础部生物化学教研室,长春,130062;上海药物研究所,上海,200031;
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为了获得翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)基因,提取恶性疟原虫海南株(FCC1)总RNA,直接用总RNA反转录成单链DNA,再用长距PCR方法扩增出双链cDNA.根据小鼠约氏疟原虫TCTP基因序列设计引物,以cDNA为模板合成了恶性疟原虫海南株TCTP基因.以pMD18-T为栽体,用大肠杆菌XL1-blue对基因克隆.测序结果表明,此基因序列与小鼠约氏疟原虫TCTP基因序列有85%同源性.由此基因序列推导出的TCTP氨基酸序列,与小鼠约氏疟原虫TCTP氨基酸序列有88%同源性.进入GennBank国际基因库(美国)检索,所克隆的基因与基因库中恶性疟原虫基因同源性为97%;由所克隆的基因序列推导的TCTP氨基酸序列,与国际基因库恶性疟原虫TCTP基因推导的TCTP氨基酸序列仅有1个氨基酸差异.恶性疟原虫海南株TCTP基因克隆为进一步研究奠定了基础.
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