【摘 要】
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目的: 制备BCR/ABL-OD结构域-HIS的重组蛋白.方法: 用RT-PCR方法扩增BCR/ABL-OD结构域的基因片段,测序正确后将其克隆入原核表达载体pET16b中,并进行酶切鉴定,鉴定正确后转化
【机 构】
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第四军医大学唐都医院血液科,第四军医大学秦都口腔医学院牙体病科,第四军医大学基础部医学遗传学和发育生物学教研室,第四军医大学解放军323医院血液科
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目的: 制备BCR/ABL-OD结构域-HIS的重组蛋白.方法: 用RT-PCR方法扩增BCR/ABL-OD结构域的基因片段,测序正确后将其克隆入原核表达载体pET16b中,并进行酶切鉴定,鉴定正确后转化大肠杆菌BL21,构建表达His-OD融合蛋白的菌株.经IPTG诱导表达后,镍-次氮基三乙酸(Ni-NTA)琼脂糖进行亲和层析纯化,用SDS-PAGE对该融合蛋白的表达产率及蛋白纯度进行了分析.结果: 获得了His-OD重组融合蛋白,纯度在95%以上,产物得率约75%.结论: 成功制备高纯度His-OD融
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