论文部分内容阅读
[目的]研究miR-125b 在胰腺癌组织及细胞系中的表达,探讨其对胰腺癌细胞增殖的影响及作用机制.[方法]QRT-PCR 检测miR-125b 在60 例胰腺癌患者癌组织和癌旁组织中,及3株胰腺癌细胞系和1 株正常胰腺导管上皮细胞中的表达;miR-125b 敲减慢病毒质粒及阴性对照空载体质粒vector感染SUIT-2细胞,经1.0Ag/ml嘌呤霉素筛选稳定敲减miR-125b或vector的SUIT-2 细胞,注射到BALB/c 裸鼠中,观察抑制miR-125b 对胰腺癌细胞体内增殖能力的影响;利用Targetscan 7.2 软件及荧光素酶报告基因试验,分析miR-125b 对A20基因的靶向作用;SUIT-2细胞转染miR-125b inhibit 和scramble 后,体外实验检测miR-125b 对细胞增殖、肿瘤坏死因子a诱导的蛋白3(tumor necrosis factor a-induced protein 3,TNFAIP3,又称 A20)和 NF-κB 信号通路关键蛋白IKKa/β、IKBa、p65的表达影响.[结果]MiR-125b在胰腺癌的组织中的表达显著高于癌旁组织(0.99±0.21 vs 0.68±0.17,P<0.05);miR-125b 在 SW1990、SUIT-2、BxPC3胰腺癌细胞系中的表达显著高于在正常胰腺导管上皮细胞HPDE6-C7 中的表达(4.81±0.13,8.63±0.27,5.64±0.21 vs 1.00±0.05,P均〈0.05);SUIT-2mirR-1a 的裸鼠成瘤体积显著低于 SUIT-2vector 细胞(P<0.05).TargetScan软件预测和荧光素酶报告基因实验验证A20为miR-125b 的靶基因;转染miR-125b inhibit 后,A20基因表达显著增加(6.98±0.18 vs 1.00±0.06,P<0.05),细胞增殖能力、NF-κB 信号通路关键蛋白IK-Kα/p ﹑IKBa、p65 的表达显著下降(P均<0.05).[结论]MiR-125b 可通过靶向调控A20/NF-κB 信号通路促进胰腺癌细胞的增殖.