【摘 要】
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目的研究全反式维甲酸(ATRA)对人胚胎肾HEK-293细胞中CD2相关蛋白(CD2AP)基因表达的影响。方法 ATRA作用HEK-293细胞后,采用RT-PCR和Western blot分别检测CD2AP mRNA及其蛋白
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目的研究全反式维甲酸(ATRA)对人胚胎肾HEK-293细胞中CD2相关蛋白(CD2AP)基因表达的影响。方法 ATRA作用HEK-293细胞后,采用RT-PCR和Western blot分别检测CD2AP mRNA及其蛋白的表达。将构建的不同Sp1/Sp3位点的定点突变、巢式缺失突变的CD2AP启动子质粒转染HEK-293细胞,检测报告质粒的荧光素酶活性。结果 ATRA明显上调HEK-293细胞中CD2AP mRNA和蛋白水平(P<0.05)。缺失突变及点突变研究显示,Sp1/Sp3-A、C位点在介导ATRA上调CD2AP过程中发挥重要作用。结论 ATRA通过Sp1/Sp3结合位点诱导HEK-293细胞中CD2AP的表达;ATRA对CD2AP基因缺陷肾病患者可能有治疗作用。
Objective To investigate the effect of all-trans retinoic acid (ATRA) on the expression of CD2-related protein (CD2AP) gene in human embryonic kidney HEK-293 cells. Methods After HEK-293 cells were treated with ATRA, the expression of CD2AP mRNA and protein was detected by RT-PCR and Western blot respectively. Site-directed mutagenesis and nested deletion mutant CD2AP promoter plasmids were constructed and transfected into HEK-293 cells. The luciferase activity of the reporter plasmids was detected. Results ATRA significantly upregulated CD2AP mRNA and protein levels in HEK-293 cells (P <0.05). Deletion and point mutation studies show that Sp1 / Sp3-A and C sites play an important role in mediating ATRA up-regulation of CD2AP. Conclusion ATRA induces CD2AP expression in HEK-293 cells via Sp1 / Sp3 binding sites. ATRA may have a therapeutic effect on patients with CD2AP-deficient nephropathy.
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