【摘 要】
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【目的】制备高特异性的肉鸡热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)单克隆抗体,研究肉鸡HSP70与热应激损伤的关系。【方法】利用RT-PCR方法扩增肉鸡HSP70mRNA,将其扩增产物
【机 构】
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南京农业大学动物医学院,农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心,临沂大学农林学院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(30170682,30571400)和教育部博士点基金项目(20050307008)致谢:本研究得到了南京农业大学张永强博士,农业部动物检疫所刘珊、王珊、王涛以及其他工作人员的帮助,谨致谢意!
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【目的】制备高特异性的肉鸡热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)单克隆抗体,研究肉鸡HSP70与热应激损伤的关系。【方法】利用RT-PCR方法扩增肉鸡HSP70mRNA,将其扩增产物克隆到PGEM-T Easy载体和原核表达载体pET-28a(+)上,进一步转化至大肠杆菌BL-21中,用IPTG诱导表达重组肉鸡HSP70。以纯化的重组肉鸡HSP70制备多克隆抗体,免疫印迹分析说明重组肉鸡HSP70具有很好的免疫原性。以纯化的重组肉鸡HSP70免疫Balb/c小鼠,通过淋巴细
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