【摘 要】
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目的 研究人巨细胞病毒(HCMV)体外感染人胚肺成纤维细胞(HELF)后即刻早期基因(UL122和UL123)、早期基因(UI54)和晚期基因(UL83)的表达情况,探讨其时序性表达关系.方法 用高感
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科,武汉,430032
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目的 研究人巨细胞病毒(HCMV)体外感染人胚肺成纤维细胞(HELF)后即刻早期基因(UL122和UL123)、早期基因(UI54)和晚期基因(UL83)的表达情况,探讨其时序性表达关系.方法 用高感染复数的HCMV AD169病毒株感染体外培养的HELF,在感染后0.5h、2.0h、4.0h、6.0h、12.0h和24.0h收获细胞,Trizol法提取各样本总RNA,并进行反转录反应,实时荧光定量PCR方法检测各时刻 UL122、UL123、UI54和UL83基因mRNA表达量.结果 1.hCMV UL122 mRNA在感染后0.5h即开始表达,在感染后2.0～4.0h mRNA表达量迅速增高,然后进人平台期(6.0～12.0h),此后略有升高;除感染后6.0h和12.0h外,余各时间点其表达差异均有统计学意义(P_a<0.01).2.hCMV UL123 mRNA在感染后0.5～6.h表达量迅速升高,此后增速变缓,略有升高.除12.0h与6.0h和24.0h表达量无差异外,余各时间点差异均有统计学意义(P_a<0.01),3.HCMV Ul54 mRNA在感染后0.5～2.0h表达量较少,4.0～6.0h明显增多,12.0～24.0h持续增高.除0.5h与2.0h,6.0h与12.0h表达无显著差异外,余不同时间点差异均有统计学意义(P_a<0.05).4.HCMV U1.83 mRNA在感染后0.5-4.0h呈低水平,6.0h后明显增多,此后持续增高;除前3个时间点外,余均有统计学差异(P_a<0.05).结论 HCMV AD169株各基因mRNA呈级联时序性表达,UL122和UL123,UL54及UL8及mRNA开始表达的时相分别为感染后0.5～4.0h、2.0～4.0h和6.0～12.0h,与各基因间连锁调控表达相一致.
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