【摘 要】
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目的探讨Kip1泛素化促进复合体蛋白1(KPC1)对肝癌细胞系Bel-7402和SMMC-7721细胞增殖与迁移能力的影响以及可能的分子机制。方法通过慢病毒包装的方法将KPC1过表达重组质粒转
【机 构】
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军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室国家蛋白质科学中心(北京);
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(91440206)
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目的探讨Kip1泛素化促进复合体蛋白1(KPC1)对肝癌细胞系Bel-7402和SMMC-7721细胞增殖与迁移能力的影响以及可能的分子机制。方法通过慢病毒包装的方法将KPC1过表达重组质粒转染进肝癌细胞系Bel-7402和SMMC-7721,筛选得到稳定过表达KPC1的肝癌细胞系;采用小干扰RNA(siRNA)瞬转敲低肝癌细胞系中的KPC1;蛋白质免疫印迹法(WB)检测肝癌细胞系中KPC1蛋白的表达水平,验证过表达和敲低KPC1的效果;CCK-8法检测KPC1对肝癌细胞系增殖能力的影响;Transwell法验证KPC1对肝癌细胞系迁移能力的影响;WB法检测扰动KPC1后p105蛋白表达水平的影响;Log-rank检验比较KPC1高表达组和低表达组肝癌患者的生存期差异。结果过表达KPC1可显著抑制Bel-7402和SMMC-7721细胞的增殖和迁移能力;而敲低KPC1显著促进Bel-7402和SMMC-7721细胞的增殖和迁移能力。过表达KPC1抑制p105的表达水平、提升p50的表达水平;而敲低KPC1则促进p105的表达水平、抑制p50的表达水平。临床相关性分析显示KPC1在肝癌癌组织中下调表达,且与肝癌患者的不良预后显著相关。结论 KPC1通过抑制肝癌细胞系的增殖和迁移能力而发挥抑癌基因的功能。
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