H5亚型禽流感病毒HA基因昆虫／杆状病毒系统的表达及对BALB／c小鼠的免疫保护

• 作 者: 孟庆文 刘光亮 于康震 童光志 刘娣 施建忠 陈化兰
• 机 构: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,东北林业大学博士后流动站、黑龙江省农业科学院博士后工作站,农业部畜牧兽医总站
• 出 处: 科技导报
• 发表日期: 2006年3期
• 关键词: 禽流感病毒血凝素 重组杆状病毒 亚单位疫苗 免疫保护 avian influenza hemagglutinin recombinant baculovirus
• 基金项目: 国家“863计划”项目（2004AA213050）,黑龙江省博士后基金项目（LRB05-351）

经RT-PCR扩增了禽流感病毒A／Goose／Guangdong／1／96H5N1亚型1.7kbHA基因的cDNA，将其克隆到pMD18-T中并测序。亚克隆到杆状病毒转移载体pMelBacA的蜜蜂蜂毒素分泌信号下游中。测序正确后与线性化的杆状病毒DNA（Bac-N-Blue^TM DNA）共转染Sf9昆虫细胞。将重组杆状病毒感染HFive细胞，72h左右收获细胞。超声波裂解。SDS-PAGE结果表明HA基因在重组杆状病毒感染的HFiVe细胞中获得表达。蛋白胶薄层扫描分析显示：表达的HA蛋白占重组杆状病毒感