【摘 要】
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目的优化人层粘连蛋白α4链LG3-4组件基因在大肠杆菌中的表达条件.方法分别从诱导温度、诱导时间、IPTG浓度等方面进行优化.表达产物经Ni-NTA介质纯化,MTT法检测目的蛋白对人
【机 构】
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重庆师范大学特殊教育学院,第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,吉林大学农学院生物化学与分子生物学教研室
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目的优化人层粘连蛋白α4链LG3-4组件基因在大肠杆菌中的表达条件.方法分别从诱导温度、诱导时间、IPTG浓度等方面进行优化.表达产物经Ni-NTA介质纯化,MTT法检测目的蛋白对人肺癌A549细胞粘附及增殖功能的影响.结果在20℃下,1 mmol/L的IPTG诱导6 h,目的蛋白呈最佳可溶性表达;在37℃下,2 mmol/L的IPTG诱导4 h,呈最佳包涵体形式表达.纯化后目的蛋白纯度达96%,且具有良好的增强人肺癌A549细胞伸展和粘附的功能.结论已确立了hLNα4LG3-4重组蛋白在大肠杆菌中的最佳
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