兔microRNA-18b生物信息学分析及其与CDK19的靶向验证

• 作 者: 李泽 江钧益 王淑辉 孙秀柱 魏泽辉
• 机 构: 西北农林科技大学动物科技学院,西北农林科技大学草业与草原学院
• 出 处: 家畜生态学报
• 发表日期: 2020年9期
• 关键词: miR-18b CDK19 兔卵巢颗粒细胞 生物信息学 双荧光素酶报告系统 miR-18bCDK19rabbit granulosa cellsbioinfor
• 基金项目: 陕西省重点研发计划(2018ZDXM-NY-041)

为探究miR-18b对兔卵巢颗粒细胞增殖凋亡的作用及潜在调控靶点,利用生物信息学技术预测兔miRNA-18b(ocu-miR-18b)的靶基因及其可能参与的生物学过程。预测结果发现靶基因的功能注释分析显著富集在细胞增殖和凋亡的调控等过程,而其中CDK19可能是miR-18b的潜在靶基因。为验证假设,将扩增的野生型及突变型的CDK19 3’UTR序列分别克隆至荧光素酶报告载体中,与miR-18b的mimics(试验组)或mimics NC(对照组)共同转染至HEK293T细胞。通过双荧光素酶报告系统检测细胞