【摘 要】
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为建立一种快速简便、灵敏度高、准确性好的犬细小病毒环介导等温扩增(LAMP)可视化检测方法,本研究根据犬细小病毒(CPV)的VP2基因保守区域设计特异性引物,通过优化引物浓度、
【机 构】
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北京市动物疫病预防控制中心,北京大兴102629
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为建立一种快速简便、灵敏度高、准确性好的犬细小病毒环介导等温扩增(LAMP)可视化检测方法,本研究根据犬细小病毒(CPV)的VP2基因保守区域设计特异性引物,通过优化引物浓度、反应温度、反应时间,建立了犬细小病毒LAMP可视化快速检测方法.结果显示,该方法在63℃条件下恒温扩增60 min具有良好的敏感性和特异性,其最低检测限为10拷贝/μL,与犬瘟热病毒、犬冠状病毒、狂犬病病毒、犬流感病毒均无交叉反应.对200份临床样品进行检测,检出阳性样品21份,与实时荧光定量PCR检测结果符合率为100％.该方法无需特殊设备,肉眼即可直接观察检测结果,具有高效、简便、特异性好、灵敏度高等优点,适用于犬细小病毒现场快速诊断.
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