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摘要
[目的]筛选防治烟草靶斑病的高效药剂。[方法]采用室内抑菌试验和田间防效试验研究10%井冈霉素水剂、20%噻氟酰胺（满穗）SC、70%甲基硫菌灵WP等12种不同药剂对烟草靶斑病的防治效果。[结果] 10%井冈霉素和20%噻氟酰胺（满穗）SC等9种药剂对烟草靶斑病菌的室内抑制效果较好。10%井冈霉素水剂和20%噻氟酰胺（满穗）SC对烟草靶斑病的田间防效最好，相对防效达到70%以上。[结论] 10%井冈霉素水剂和20%噻氟酰胺（满穗）SC可以作为防治烟草靶斑病的推荐药剂。
关键词烟草靶斑病；不同药剂；药效
中图分类号S435.72文献标识码
A文章编号0517-6611（2015）25-096-02
Abstract [Objective] The aim was to screen out effective fungicides on tobacco target spot. [Method] Control effects of 12 kinds of fungicides against tobacco target spot were studied through laboratory inhibition test and field test. [Result] The laboratory test showed that 10% Jinggangmycin aqueous solutions and 20% Trifluzamide suspension and other 7 fungicides had excellent effect against Rhizoctonia solani AG3， the growth of mycelium was inhibited. The field control effect results showed that the relative control effect of 10% Jinggangmycin aqueous solutions and 20% Trifluzamide suspension concentrate were both above 70%. [Conclusion] The 10% Jinggangmycin aqueous solutions and 20% Trifluzamide suspension concentrate could be used to control tobacco target spot.
Key words Tobacco target spot； Different fungicides； Control effect
烟草靶斑病由立枯丝核菌（Rhizoctonia solani AG3）引起，该病菌主要为害烟草叶片，形成褪绿病斑，直至坏死部分穿孔[1-2]。近年来，烟草靶斑病在辽宁省丹东市、铁岭市有加重发生的趋势，造成较大的经济损失，已经成为影响烟草产量和质量的重要病害之一。目前，尚未发现较好的抗病品种，药剂防治依然是控制烟草靶斑病的主要手段[3]。笔者研究了10%井冈霉素水剂、20%噻氟酰胺（满穗）SC、70%甲基硫菌灵WP 等12种不同的药剂对烟草靶斑病的室内抑菌效果，并于2011和2012年研究了不同的药剂防治烟草靶斑病的田间药效，以期筛选出合适的防治烟草靶斑病的高效药剂。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1供试药剂。10%井冈霉素水剂、20%噻氟酰胺（满穗）SC、70%甲基硫菌灵WP、40%菌核净WP、50%退菌特、32.5%嘧菌酯·苯醚甲环唑WP、80%多菌灵、5%井冈霉素粉剂、20%肟菌酯·戊唑醇、50%代森锰锌等不同药剂。
1.1.2供试菌种。沈阳农业大学烟草研究所分离、保存的烟草靶斑病菌菌株LN9。
1.2方法
1.2.1室内药剂筛选试验。
参照伏颖等[4]的抑菌圈法和生长速率法。
1.2.1.1
抑菌圈法。用无菌水将药剂分别稀释成所需浓度，取1.0 ml菌丝悬浮液加入到9.0 ml融化好的PDA培养基中，摇匀，倒入培养皿中，待培养基凝固后，将无菌牛津杯放入含有菌丝的培养皿中央，分别向牛津杯中加入0.2 ml不同的药剂，以加入0.2 ml无菌水做对照，每个处理3次重复，最后将培养皿置于25 ℃恒温培养箱中培养2 d，采用十字交叉法测量抑菌圈直径，根据抑菌圈的大小确定适合防治烟草靶斑病的药剂。
1.2.1.2
生长速率法。将供试药剂用无菌水分别稀释至所需浓度10倍的药液，取1.0 ml药液加入9.0 ml融化好的PDA培养基中，摇匀后直接倒入无菌培养皿中，以加入等体积无菌水的培养基做对照。用7 mm的打孔器切取菌饼，菌丝面朝下放置于PDA平板中央，每个培养皿中放1块，每个处理3次重复，将培养皿放置于25 ℃恒温培养箱中培养2 d，用十字交叉法测量菌丝直径，计算不同处理对菌丝生长的抑制率，分析不同药剂对菌丝生长的影响。
菌丝生长抑制率=[（对照组菌落直径-7）-（处理组菌落直径-7）]/（对照菌落直径-7）×100%
1.2.2田间药效试验。
根据室内药剂试验的筛选结果选择其中9个综合防效较好的药剂进行田间药效试验。试验地点安排在辽宁省丹东市凤城烟地，以当地主栽烟草品种CH001为试验材料，每小区 60株烟草，株距为50 cm， 垄宽为1.2 m，面积约100 m2。每种药剂按推荐浓度使用，3次重复，以清水为对照。用背负式喷雾器均匀喷雾。施药时间分别为2011年8月和2012年8月，每种药剂设置1个小区，喷药前先调查每个小区的发病情况，每个小区3垄，每垄60株烟草，采取5点取样法，每点调查3株，每株调查8片烟叶，记录病级。烟草靶斑病病情分级标准：0级——无病；1级——病斑面积占叶片面积的1%以下；3级——病斑面积占叶片面积的1%～10%；5级——病斑面积占叶片面积的11%～30%；7级——病斑面积占叶片面积的31%～50%；9级——病斑面积占叶片面积的51%以上。 病情指数=（各级病叶数×各级代表值）/（调查总叶数×最高一级代表值）×100
相对防效=（对照病指增长率-处理病指增长率）/对照病指增长率×100%
2结果与分析
2.1室内药剂筛选
菌丝生长速率测定结果表明（表1）：各个药剂对菌丝的抑制作用并不相同，以40%菌核净和50%退菌特的效果最好，其抑制率分别为100%和99.23%；其次为20%噻氟酰胺（满穗）SC和10%井冈霉素水剂，其抑制率分别为97.69%和96.15%；然后是70%甲基硫菌灵、32.5%嘧菌酯·苯醚甲环唑WP、80%多菌灵、5%井冈霉素粉剂和20%肟菌酯·戊唑醇，其抑制率均在50%以上，50%多菌灵、70%代森锰锌、50%腐霉利的抑菌效果最差，抑制率均在30%以下。
抑菌圈法测定结果表明（表2）：供试药剂中，对烟草靶斑病菌抑制效果最好的为20%噻氟酰胺（满穗）SC，抑菌圈直径为56.3 mm；其次为40%菌核净和10%井冈霉素，其抑菌圈直径均在50 mm以上；50%退菌特、70%甲基硫菌灵、32.5%嘧菌酯·苯醚甲环唑WP的抑菌圈直径在30 mm以上；80%多菌灵、5%井冈霉素粉剂和20%肟菌酯·戊唑醇的抑菌圈直径在26.0～29.6 mm；50%多菌灵、70%代森锰锌、50%腐霉利的抑菌圈直径均为0。
结合生长速率测定法和抑菌圈法的试验结果得知：20%噻氟酰胺（满穗）SC、40%菌核净、10%井冈霉素水剂、50%退菌特、70%甲基硫菌灵、32.5%嘧菌酯·苯醚甲环唑WP、80%多菌灵、5%井冈霉素粉剂、20%肟菌酯·戊唑醇9种药剂对烟草靶斑病菌的抑制作用较好，可用于后续的田间药效试验。
2.2不同药剂对烟草靶斑病的田间药效由表3可知，2011年喷药后7 d调查发现，10%井冈霉素水剂的防治效果最佳，达到72.30%，其次是20%噻氟酰胺（满穗）SC，相对防效达到69.91%，相对防效最差的是5%井冈霉素粉剂和20%肟菌酯·戊唑醇，分别为45.52%和40.63%，其余药剂的相对防效都在50%以上。2012年喷施相同药剂7 d后调查发现，相对防效较好的依然是10%井冈霉素水剂和20%噻氟酰胺（满穗）SC，分别为65.07%和71.82%，其次是70%甲基硫菌灵WP、40%菌核净WP、50%退菌特，三者相对防效也都达到50%以上，32.5%嘧菌酯·苯醚甲环唑WP、80%多菌灵、5%井冈霉素粉剂、20%肟菌酯·戊唑醇的相对防效在40.99%～47.99%。
3结论与讨论
室内药剂筛选试验通过生长速率测定法和抑菌圈法测定各个药剂对烟草靶斑病菌的抑制作用。结果表明，10%井冈霉素水剂、20%噻氟酰胺（满穗）SC对菌丝生长的抑制效果较明显。丹东地区2年的试验结果表明，10%井冈霉素水剂和20%噻氟酰胺（满穗）SC对烟草靶斑病的相对防效均最好，可以作为防治烟草靶斑病的推荐药剂；70%甲基硫菌灵WP、40%菌核净WP和50%退菌特的相对防效也都在50%以上，可以考虑用于防治烟草靶斑病。伏颖等[4]通过研究不同药剂对烟草靶斑病菌的抑菌作用发现菌核净在抑制菌丝生长方面表现尤其突出，与该试验结果相吻合。由于气候环境的影响，相同的药剂在不同年份的防效也表现不同，因此，在实际生产施药过程中要充分考虑环境的影响，施药选在早晨、傍晚或者阴天进行，使药剂防效得到保证[5]，同时还要注意各种药剂的轮换使用，防止长期使用1种药剂而产生的抗药性，降低防治效果[6]。
参考文献
[1]
吴元华，王左斌，刘志恒，等.我国烟草新病害：烟草靶斑病[J].中国烟草学报，2006，12（6）：22-23.
[2] 吴元华，赵艳琴，赵秀香，等.烟草靶斑病病原鉴定及生物学特性研究[J].沈阳农业大学学报，2012，43（5）：521-527.
[3] 刘斯泓，纪明山.防治烟草靶斑病的复配药剂配方筛选及田间药效试验[J].江苏农业科学，2014，42（6）：140-143.
[4] 伏颖，吴元华，穆凌霄，等.烟草靶斑病室内药剂筛选[J].江苏农业科学，2011，39（3）：153-155.
[5] 王左斌，吴元华，赵秀香，等.“嘧肽菌净”对烟草靶斑病的抑菌作用及田间药效试验[J].烟草科技，2007（9）：61-65.
[6] 叶建如，顾刚，张瀛.几种药剂防治烟草青枯病的药效评价[J].中国烟草科学，2013，34（1）：72-77.
[目的]筛选防治烟草靶斑病的高效药剂。[方法]采用室内抑菌试验和田间防效试验研究10%井冈霉素水剂、20%噻氟酰胺（满穗）SC、70%甲基硫菌灵WP等12种不同药剂对烟草靶斑病的防治效果。[结果] 10%井冈霉素和20%噻氟酰胺（满穗）SC等9种药剂对烟草靶斑病菌的室内抑制效果较好。10%井冈霉素水剂和20%噻氟酰胺（满穗）SC对烟草靶斑病的田间防效最好，相对防效达到70%以上。[结论] 10%井冈霉素水剂和20%噻氟酰胺（满穗）SC可以作为防治烟草靶斑病的推荐药剂。
关键词烟草靶斑病；不同药剂；药效
中图分类号S435.72文献标识码
A文章编号0517-6611（2015）25-096-02
Abstract [Objective] The aim was to screen out effective fungicides on tobacco target spot. [Method] Control effects of 12 kinds of fungicides against tobacco target spot were studied through laboratory inhibition test and field test. [Result] The laboratory test showed that 10% Jinggangmycin aqueous solutions and 20% Trifluzamide suspension and other 7 fungicides had excellent effect against Rhizoctonia solani AG3， the growth of mycelium was inhibited. The field control effect results showed that the relative control effect of 10% Jinggangmycin aqueous solutions and 20% Trifluzamide suspension concentrate were both above 70%. [Conclusion] The 10% Jinggangmycin aqueous solutions and 20% Trifluzamide suspension concentrate could be used to control tobacco target spot.
Key words Tobacco target spot； Different fungicides； Control effect
烟草靶斑病由立枯丝核菌（Rhizoctonia solani AG3）引起，该病菌主要为害烟草叶片，形成褪绿病斑，直至坏死部分穿孔[1-2]。近年来，烟草靶斑病在辽宁省丹东市、铁岭市有加重发生的趋势，造成较大的经济损失，已经成为影响烟草产量和质量的重要病害之一。目前，尚未发现较好的抗病品种，药剂防治依然是控制烟草靶斑病的主要手段[3]。笔者研究了10%井冈霉素水剂、20%噻氟酰胺（满穗）SC、70%甲基硫菌灵WP 等12种不同的药剂对烟草靶斑病的室内抑菌效果，并于2011和2012年研究了不同的药剂防治烟草靶斑病的田间药效，以期筛选出合适的防治烟草靶斑病的高效药剂。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1供试药剂。10%井冈霉素水剂、20%噻氟酰胺（满穗）SC、70%甲基硫菌灵WP、40%菌核净WP、50%退菌特、32.5%嘧菌酯·苯醚甲环唑WP、80%多菌灵、5%井冈霉素粉剂、20%肟菌酯·戊唑醇、50%代森锰锌等不同药剂。
1.1.2供试菌种。沈阳农业大学烟草研究所分离、保存的烟草靶斑病菌菌株LN9。
1.2方法
1.2.1室内药剂筛选试验。
参照伏颖等[4]的抑菌圈法和生长速率法。
1.2.1.1
抑菌圈法。用无菌水将药剂分别稀释成所需浓度，取1.0 ml菌丝悬浮液加入到9.0 ml融化好的PDA培养基中，摇匀，倒入培养皿中，待培养基凝固后，将无菌牛津杯放入含有菌丝的培养皿中央，分别向牛津杯中加入0.2 ml不同的药剂，以加入0.2 ml无菌水做对照，每个处理3次重复，最后将培养皿置于25 ℃恒温培养箱中培养2 d，采用十字交叉法测量抑菌圈直径，根据抑菌圈的大小确定适合防治烟草靶斑病的药剂。
1.2.1.2
生长速率法。将供试药剂用无菌水分别稀释至所需浓度10倍的药液，取1.0 ml药液加入9.0 ml融化好的PDA培养基中，摇匀后直接倒入无菌培养皿中，以加入等体积无菌水的培养基做对照。用7 mm的打孔器切取菌饼，菌丝面朝下放置于PDA平板中央，每个培养皿中放1块，每个处理3次重复，将培养皿放置于25 ℃恒温培养箱中培养2 d，用十字交叉法测量菌丝直径，计算不同处理对菌丝生长的抑制率，分析不同药剂对菌丝生长的影响。
菌丝生长抑制率=[（对照组菌落直径-7）-（处理组菌落直径-7）]/（对照菌落直径-7）×100%
1.2.2田间药效试验。
根据室内药剂试验的筛选结果选择其中9个综合防效较好的药剂进行田间药效试验。试验地点安排在辽宁省丹东市凤城烟地，以当地主栽烟草品种CH001为试验材料，每小区 60株烟草，株距为50 cm， 垄宽为1.2 m，面积约100 m2。每种药剂按推荐浓度使用，3次重复，以清水为对照。用背负式喷雾器均匀喷雾。施药时间分别为2011年8月和2012年8月，每种药剂设置1个小区，喷药前先调查每个小区的发病情况，每个小区3垄，每垄60株烟草，采取5点取样法，每点调查3株，每株调查8片烟叶，记录病级。烟草靶斑病病情分级标准：0级——无病；1级——病斑面积占叶片面积的1%以下；3级——病斑面积占叶片面积的1%～10%；5级——病斑面积占叶片面积的11%～30%；7级——病斑面积占叶片面积的31%～50%；9级——病斑面积占叶片面积的51%以上。 病情指数=（各级病叶数×各级代表值）/（调查总叶数×最高一级代表值）×100
相对防效=（对照病指增长率-处理病指增长率）/对照病指增长率×100%
2结果与分析
2.1室内药剂筛选
菌丝生长速率测定结果表明（表1）：各个药剂对菌丝的抑制作用并不相同，以40%菌核净和50%退菌特的效果最好，其抑制率分别为100%和99.23%；其次为20%噻氟酰胺（满穗）SC和10%井冈霉素水剂，其抑制率分别为97.69%和96.15%；然后是70%甲基硫菌灵、32.5%嘧菌酯·苯醚甲环唑WP、80%多菌灵、5%井冈霉素粉剂和20%肟菌酯·戊唑醇，其抑制率均在50%以上，50%多菌灵、70%代森锰锌、50%腐霉利的抑菌效果最差，抑制率均在30%以下。
抑菌圈法测定结果表明（表2）：供试药剂中，对烟草靶斑病菌抑制效果最好的为20%噻氟酰胺（满穗）SC，抑菌圈直径为56.3 mm；其次为40%菌核净和10%井冈霉素，其抑菌圈直径均在50 mm以上；50%退菌特、70%甲基硫菌灵、32.5%嘧菌酯·苯醚甲环唑WP的抑菌圈直径在30 mm以上；80%多菌灵、5%井冈霉素粉剂和20%肟菌酯·戊唑醇的抑菌圈直径在26.0～29.6 mm；50%多菌灵、70%代森锰锌、50%腐霉利的抑菌圈直径均为0。
结合生长速率测定法和抑菌圈法的试验结果得知：20%噻氟酰胺（满穗）SC、40%菌核净、10%井冈霉素水剂、50%退菌特、70%甲基硫菌灵、32.5%嘧菌酯·苯醚甲环唑WP、80%多菌灵、5%井冈霉素粉剂、20%肟菌酯·戊唑醇9种药剂对烟草靶斑病菌的抑制作用较好，可用于后续的田间药效试验。
2.2不同药剂对烟草靶斑病的田间药效由表3可知，2011年喷药后7 d调查发现，10%井冈霉素水剂的防治效果最佳，达到72.30%，其次是20%噻氟酰胺（满穗）SC，相对防效达到69.91%，相对防效最差的是5%井冈霉素粉剂和20%肟菌酯·戊唑醇，分别为45.52%和40.63%，其余药剂的相对防效都在50%以上。2012年喷施相同药剂7 d后调查发现，相对防效较好的依然是10%井冈霉素水剂和20%噻氟酰胺（满穗）SC，分别为65.07%和71.82%，其次是70%甲基硫菌灵WP、40%菌核净WP、50%退菌特，三者相对防效也都达到50%以上，32.5%嘧菌酯·苯醚甲环唑WP、80%多菌灵、5%井冈霉素粉剂、20%肟菌酯·戊唑醇的相对防效在40.99%～47.99%。
3结论与讨论
室内药剂筛选试验通过生长速率测定法和抑菌圈法测定各个药剂对烟草靶斑病菌的抑制作用。结果表明，10%井冈霉素水剂、20%噻氟酰胺（满穗）SC对菌丝生长的抑制效果较明显。丹东地区2年的试验结果表明，10%井冈霉素水剂和20%噻氟酰胺（满穗）SC对烟草靶斑病的相对防效均最好，可以作为防治烟草靶斑病的推荐药剂；70%甲基硫菌灵WP、40%菌核净WP和50%退菌特的相对防效也都在50%以上，可以考虑用于防治烟草靶斑病。伏颖等[4]通过研究不同药剂对烟草靶斑病菌的抑菌作用发现菌核净在抑制菌丝生长方面表现尤其突出，与该试验结果相吻合。由于气候环境的影响，相同的药剂在不同年份的防效也表现不同，因此，在实际生产施药过程中要充分考虑环境的影响，施药选在早晨、傍晚或者阴天进行，使药剂防效得到保证[5]，同时还要注意各种药剂的轮换使用，防止长期使用1种药剂而产生的抗药性，降低防治效果[6]。
参考文献
[1]
吴元华，王左斌，刘志恒，等.我国烟草新病害：烟草靶斑病[J].中国烟草学报，2006，12（6）：22-23.
[2] 吴元华，赵艳琴，赵秀香，等.烟草靶斑病病原鉴定及生物学特性研究[J].沈阳农业大学学报，2012，43（5）：521-527.
[3] 刘斯泓，纪明山.防治烟草靶斑病的复配药剂配方筛选及田间药效试验[J].江苏农业科学，2014，42（6）：140-143.
[4] 伏颖，吴元华，穆凌霄，等.烟草靶斑病室内药剂筛选[J].江苏农业科学，2011，39（3）：153-155.
[5] 王左斌，吴元华，赵秀香，等.“嘧肽菌净”对烟草靶斑病的抑菌作用及田间药效试验[J].烟草科技，2007（9）：61-65.
[6] 叶建如，顾刚，张瀛.几种药剂防治烟草青枯病的药效评价[J].中国烟草科学，2013，34（1）：72-77.